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冻存原代细胞如何复苏培养?

更新日期:2018年05月16日 浏览次数: 文章来源:本站原创
 
     

1,将细胞从液氮罐中取出后,迅速放入37摄氏度水浴中解冻。(注意防护手部和脸部,避免液氮溅出冻伤)

2,水浴中解冻时间控制在90秒以内。

3,将冻存管从水浴中移除,用70%浓度酒精消毒,避免污染。

4,将细胞悬液移至提前放入完全培养基的培养皿或培养瓶中,接种密度根据细胞的类型不同,我们建议按照细胞数量8000个/cm2的密度接种。

5,部分细胞可能需要提前包被培养瓶或培养皿。

6,将培养瓶或者培养皿放置在细胞培养箱中。(37摄氏度,5%CO2)

7,我们建议在细胞复苏后12h-24h内更换培养液,此后每48h换一次培养基,细胞密度大于50%以后每24h换培养液。





 

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